孢子链的线菌长度不一
2.2拮抗菌抑菌谱测定
3株拮抗放线菌菌株抑制其他病原菌的抑制烟草结果如表1所示,3株放线菌的青枯固体菌块和发酵液对烟草猝倒病原菌均无抑制效果,菌株SC-105-B-10的株放发酵液和菌株L2-003-A-5的固体菌块对烟草黑胫病原菌具有较弱的抑制效果;3株菌的固体菌块和发酵液对赤星病原菌均有抑制效果,对辣椒、线菌番茄和马铃薯等茄科类植物青枯病原菌均有抑制作用,筛选即3株放线菌对茄科类植物青枯病原菌具有广谱的抑制烟草拮抗作用。
2.3菌株SC-105-B-10的青枯鉴定
2.3.1菌株的SC-105-B-10形态特征
菌株SC-105-B-10在扫描电镜下的形态如图2所示,菌株的株放气生菌丝明显呈短直链状,孢子链的线菌长度不一;孢子呈短圆柱形,四周有内陷现象。筛选气生菌丝生长能力强,抑制烟草基内菌丝错综生长,青枯孢子链密集。株放将菌株SC-105-B-10在供试的线菌8种培养基上进行培养和观察,发现在马铃薯浸汁琼脂和营养琼脂中长势很弱,筛选但在高氏一号琼脂上长势较好(图3);在其他8种培养基上气生菌丝多呈灰白或淡黄色,基内菌丝呈灰绿色,无可溶性色素(表2)。
2.3.2菌株SC-105-B-10的生理生化特征
通过对各拮抗菌株生理生化特征的检测,获得如表3所示的实验结果。菌株SC-105-B-10的pH生长范围是6~9,pH7~8时长势最好,在低于pH6和高于pH9的条件下不能生长。菌株SC-105-B-10耐受10%NaCl;可生长的温度范围为25~45℃,最适温度为30℃。淀粉水解试验、凝固牛奶、纤维素、油脂、产H2S、过氧化氢酶和甲基红反应阳性,液化明胶、硝酸盐还原和苯丙氨酸脱氢酶反应呈阴性。
2.3.3菌株SC-105-B-10的16SrRNA基因部分序列分析
测序结果表明菌株SC-105-B-10的16SrRNA基因部分序列长度为1492bp,在GenBank核酸登录号为KT633863。根据系统发育分析,菌株SC105-B-10属于链霉菌属(Streptomyces),与Streptomy-cesgriseussubsp.griseusKCTC9080T、Streptomycescy-aneofuscatusNRRLB-2570T、Streptomycescinereorec-tusNBRC15395T、StreptomycesfulvorobeusNBRC15897T、StreptomycesmicroflavusNBRC13062T和StreptomycesfulvissimusDSM40593T聚为一簇,与这些菌的16SrRNA基因序列相似性均为99.7%。通过邻接法构建的基于菌株SC-105-B-10及相关菌株16SrDNA序列的系统发育树如图4所示。
综合分析多种链霉菌的特性(Rongetal,2010;黄苛等,2010;邵阳,2011;李涛等,2007),菌株SC-105-B-10的形态特征和生理生化特征与细黄链霉菌(S.microflavus)更接近(王慧玲等,2009;Da‐vid,2011;Lanootetal,2005),因此判断SC-105-B10是细黄链霉菌的一个菌株。
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